항원특이적 T 세포를 사용한 ACT 임상연구가 성공했음에도 불구하고 안정적인 T 세포 생산은 여전히 어려운 문제이다. 항원특이적 CD8 T 세포를의 4-1BB 발현특성을 이용하여 간단하고 실용적인 암항원 특이적 CD8 T 세포 배양방법을 개발하였으며, 이를 기반으로 고형암 환자의 PBMC에서 hTERT-specific CD8T(TERTiNT) 세포를 분리 및 증식에 성공하였다. 대부분의 고형암세포들이 hTERT를 과발한하므로, hTERT-specific CD8T 세포는 많은 고형암의 치료에 사용될 수 있을 것으로 기대된다.

이 프로토콜은 고형암 환자에서 자가유래 hTERT-specific CD8 T 세포의 안정성과 이 T 세포의 투여를 통해 환자의 항암면역반응을 증가시킬 수 있을 것으로 기대한다. 따라서 본 연구의 목적은 아래와 같다.

1차 목적
1. 표준치료법이 실패한 고형암 재발 환자의 TERTiNT cells의 최대내성용량 (MTD) 결정
2. 표준치료법이 실패한 고형암 재발 환자의 자가조직 TERTiNT 세포의 안정성 평가

2차 목적
1. 표준치료법이 실패한 고형암 재발 환자의 TERTiNT 세포의 항암효과 가능성 조사

1. 약물이름: 자가유래 hTERT-specific CD8 T 세포 (TERTiNT cells)

2. 용량
   - 용량 단계 1:  4.0 x 10e8/m2 (day 0)
   - 용량 단계 2:  1g/m2 cytoxan (day -3) + 4.0 x 10e8/m2 (day 0) 
   - 용량 단계 3:  1g/m2 cytoxan (day -3) + 4.0 x 10e8/m2 (day 0)  + 250,000 IU/m2 human IL-2 (day 0-7, B.I.D./day)
   - 용량 단계 4:  1g/m2 cytoxan (day -3) + 8.0 x 10e8/m2 (day 0)  + 250,000 IU/m2 human IL-2 (day 0-7, B.I.D./day)
   - 용량 단계 5:  1g/m2 cytoxan (day -5) + 25mg/m2 fludarabine (day -4 & -3) + 8.0 x 10e8/m2 (day 0)  + 250,000 IU/m2 human IL-2 (day 0-7, B.I.D./day)
   - 용량 단계 6:  1g/m2 cytoxan (day -5) + 25mg/m2 fludarabine (day -4 & -3) + 16.0 x 10e8/m2 (day 0)  + 250,000 IU/m2 human IL-2 (day 0-7, B.I.D./day)

3. 치료 계획
   1) 시험대상자 등록 후 말초 혈액 50cc를 채혈하여 이 중 단핵구를 추출하고 31일 간의 배양을 거쳐 TERTiNT cell을 배양한다.
   2) CD8 T 세포 주입 전 cyclophosphamide +/- fludarabine을 용량단계에 맞춰 정맥 주사한다. 
   3) 31일간 배양된 hTERT 특이적 자가유래 CD8 T 세포를 주어진 용량 단계에 따라 1회 정맥 주사한다. 
   4) 250,000U IU/m2 IL-2를 1일 2회 CD8 T 세포 주입 후 6시간 후부터 Day 0부터 Day+7까지 최대 14회 피하 투여한다. 투여 일 수는 시험대상자의 IL-2에 대한 내약성에 따라 조절될 수 있다. 
   5) CD8 T 세포 주입 후 4주간 급성 이상 반응 여부를 관찰한다.

상세내용

최종배양된  TERTiNT 세포를 정맥주사
투여량:  4.0 x 10e8/m2

상세내용

- 1g/m2 cytoxan 정맥주사 (day -3)
- 최종배양된  TERTiNT 세포를 정맥주사: 4.0 x 10e8/m2 TERTiNT 세포

상세내용

- 1g/m2 cytoxan 정맥주사 (day -3)
- 최종배양된  TERTiNT 세포를 정맥주사: 4.0 x 10e8/m2 TERTiNT 세포
- 250,000 IU/m2 human IL-2 근육주사 (day 0-7, B.I.D./day)

상세내용

- 1g/m2 cytoxan 정맥주사 (day -3)
- 최종배양된  TERTiNT 세포를 정맥주사: 8.0 x 10e8/m2 TERTiNT 세포
- 250,000 IU/m2 human IL-2 근육주사 (day 0-7, B.I.D./day)

상세내용

- 1g/m2 cytoxan 정맥주사 (day -5)
- 25mg/m2 fludarabine 정맥주사 (day -4 & -3)
- 최종배양된  TERTiNT 세포를 정맥주사: 8.0 x 10e8/m2 TERTiNT 세포
- 250,000 IU/m2 human IL-2 근육주사 (day 0-7, B.I.D./day)

상세내용

- 1g/m2 cytoxan 정맥주사 (day -5)
- 25mg/m2 fludarabine 정맥주사 (day -4 & -3)
- 최종배양된  TERTiNT 세포를 정맥주사: 16.0 x 10e8/m2 TERTiNT 세포
- 250,000 IU/m2 human IL-2 근육주사 (day 0-7, B.I.D./day)

표준치료에 불응하여 재발한 고형암

1) 20세 이상 75세 이하의 남녀
2) 조직학적으로 혹은 세포학적으로 확인된 진행성 고형암 시험대상자로서 표준 치료에 실패하거나 불응한 경우 또는 시행할 수 없는 경우
3) hTERT 항원 에피토프 사전 선별 검사에서 배양 적합성 판정을 받은 경우
4) 일상수행능력 척도 (ECOG scale) ≤ 2

1) 증상이 있는 또는 조절되지 않는 중추신경계 전이
2) 시험 등록 3주 이내에 수술, 방사선 치료, 항암제 치료를 받은 과거력
3) 다음과 같은 검사 결과
- 백혈구 수 < 2,500/μL
- 절대 중성구 수 <1,000/μL 
- 혈소판 수 <50,000/μL 
- 헤모글로빈 <9 g/dL
- 혈청 크리아티닌 >2.0 mg/dL
- AST/ALT >3 x upper limit of normal range (ULN), 
간전이가 있는 경우 >5 x ULN
- 총 빌리루빈 >2.0 mg/dL
- 프로트롬빈 시간 >1.5 x ULN
4) 다음을 포함한 임상적으로 유의한 활성 심장 혈관 질환: 
조절되지 않은 고혈압 (즉, 수축기 혈압 >180mmHg, 이완기 혈압 >100mmHg), 불안정형 협심증, 폐 색전증, 뇌혈관 질환, 판막증, 울혈성 심부전, 혹은 지난 6개월 이내에 발생한 심근 경색, 또는 중대한 심장성 부정맥
5) Anti-HIV 항체 양성
6) 자가면역질환이나 염증성 질환의 소견이 있는 경우
7) 조절되지 않는 활성 감염성/신경성 질환 (현재 비경구 항생제투여를 요하는 활동성 세균 감염증의 경우)
8) 이전에 면역 세포 치료제를 투여 받은 적이 있는 경우
9) 임신, 또는 모유 수유

표준 치료에 실패한 진행성 고형암 시험대상자를 대상으로 hTERT 항원 특이적 자가유래 CD8 T 세포 면역치료요법의 최대 내성 용량 (MTD) 결정

TERTiNT cell  투여 후 4주차

용량제한독성

TERTiNT cell  투여 후 4주차

안정성

TERTiNT cell  투여 후 4주차

이상반응

TERTiNT cell  투여 후 24주까지

임상적효능평가

TERTiNT cell  투여 후 24주까지